果蔬汁中六六六、滴滴涕含量测定浅析

   六六六、滴滴涕为高效广谱有机氯杀虫剂，具有化学性质稳定、易于在生物体内蓄积，在环境中残留半衰期长（可达数年之久，最长可达10年）等特点，因此，该类化合物仍然为我国食品中农药残留的主要检测品种。目前，多用GB/T5009.19-2008《食品中有机氯农药多组分残留量的测定》进行检测，本试验按照此标准第二法《填充柱气相色谱-电子捕获检测法》进行测定。测定中诸多因素直接影响测定结果，现将此法做一分析，细化样品前处理，提出操作要点。

    材料与方法

    1.材料

    1.1 样品：样品Ⅰ和样品Ⅱ（以下简称Ⅰ和Ⅱ）。

    1.2仪器及试剂：岛津GC-2010，填充柱为有机氯分析专用柱。试剂为GB/T5009.19-2008规定试剂。

    2.方法

    2.1样品提取：称取具有代表性的各类食品匀浆20g于150mL具塞三角瓶中，加丙酮40mL，振荡30min，加氯化钠6g，摇匀。加石油醚30mL，再振荡30min，转移至100mL具塞量筒中，静置分层。读取并记录提取上清液体积，取上清液35mL，缓慢放入盛有无水硫酸钠的漏斗中脱水，与旋转蒸发器中浓缩至近干，以石油醚定容至5mL，加浓硫酸0.5mL净化，阵摇0.5min，于3000r/min离心15min，取上清液进行GC分析。

    此方法与GB/T5009.19-2008第二法相比，细化之处为：

    ⑴明确样品直接称取在具塞三角瓶中。

    ⑵加石油醚振荡后，直接将混合液转移至100mL具塞量筒中。

    ⑶读取提取上清夜体积。

    2.2 样品前处理方法：样品Ⅰ和Ⅱ分别用两种前处理方法处理。

   方法一：加丙酮和石油醚振荡时振荡幅度小，加浓硫酸净化时水平方向振摇，以下称此方法为A。例:编号A-Ⅱ，表示样品Ⅱ用方法一所做的试验。

   方法二：加丙酮和石油醚振荡时旋摇充分，加浓硫酸净化时上下剧烈振摇，以下称此方法为B。

    其他步骤两法相同，按1.2操作，每个试样每种方法各做3平行，编号分别为A-Ⅰ-1…A-Ⅰ-3，A-Ⅱ-1…A-Ⅱ-3；B-Ⅰ-1 …B-Ⅰ-3，B-Ⅱ-1…B-Ⅱ-3。

    2.3 气相色谱条件

    2.3.1 色谱柱：有机氯专用柱，内径5mm，长2m的玻璃柱。

    2.3.2 柱温：程序升温

    2.3.3 进样口温度：250℃。

    2.3.4 检测器：电子捕获检测器（ECD），温度280℃。

    3.计算公式

   根据现气相色谱的特点，可直接得到样品处理液中六六六、滴滴涕异构体的单一测定浓度，试样中六六六、滴滴涕及其异构体或代谢物的单一含量可按公式计算：

   Xi——试样中六六六、滴滴涕及其异构体或代谢物的单一含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；

   Ci——样品处理液中六六六、滴滴涕异构体的单一测定浓度,单位为微克每毫升(ug/mL)；

    V——提取溶液总体积，单位为毫升（mL）；

    V1——移取提取液体积，单位为毫升（mL）；

    V2——样品提取液定容体积，单位为毫升（mL）；

    m——被测定试样的取样量，单位为毫升（mL）。

    计算结果保留两位有效数字。

    结果与分析

    1.结果

    下表为方法A和B测定样品Ⅰ和Ⅱ中六六六、滴滴涕及其异构体含量的结果。

   由上表可知，方法B，即加丙酮和石油醚时振荡幅度大，加浓硫酸上下充分振摇净化时，测试样品中六六六、滴滴涕及其异构体含量测定结果明显比方法A振荡幅度小、加浓硫酸水平振摇净化时高，说明加丙酮和石油醚时振荡幅度大，加浓硫酸上下充分振摇净化可较充分地提取样品中的六六六、滴滴涕。

    2.分析

   用GB/T5009.19-2008《食品中有机氯农药多组分残留量的测定》第二法测定果蔬汁中六六六、滴滴涕含量时，需注意以下几点：

   ⑴加丙酮和石油醚后，振荡幅度不宜过小，以锥形瓶中溶液旋摇充分为宜，震荡幅度过小不能充分提取所需组分。

   ⑵加氯化钠后要充分摇匀，一方面可提高丙酮在石油醚中的溶解度，另一方面可减少振荡时发生剧烈乳化现象。加氯化钠充分摇匀且加石油醚后充分旋摇，提取后上清液体积一般在64mL左右；加氯化钠摇匀不充分且加石油醚后旋摇不充分，上清液体积一般在59左右。

   ⑶取上清液35mL时不易用移液管，因移液管移取溶液时不易控制，溶液易洒落。提取的上清液为石油醚（沸程30℃-60℃）和丙酮的混合液，有机相溶液的张力较小，石油醚沸程较低，用移液管移取时，手触外管壁，低沸点溶液汽化，产生压力，二者均可迫使管中液体外流洒落。

    ⑷用无水硫酸钠脱水时，速度不宜过快，以防脱水不彻底。

    ⑸旋转蒸发仪水浴温度45℃-50℃较宜。

    (6)蒸发要至近干，具体指蒸发后残留物可在容器壁上保持似流不流状态。

   ⑺加浓硫酸净化时，要充分阵摇（上下剧烈振摇）。水平振摇，上清液为黄绿色或淡黄色，下浊液为黄褐色或红褐色；上下剧烈振摇，上清液为清亮无色，下浊液为黑褐色或黑色。

   ⑻用石油醚定容至5mL，可定容至10mL比色管中，有利于加浓硫酸后充分振荡，便于提取净化。

    ⑼无水硫酸钠脱水不彻底或蒸发没至近干，加浓硫酸净化时溶液会产热甚至迸溅。

    （作者单位：新疆昌吉州产品质量检验所）